食品中合成著色劑的測定液相色譜儀

測定食品中的合成著色劑案例

食用著色劑，又稱食用色素，使食品著色，從而改善食品色調和色澤。食用色素改變食品感官色彩，刺激人們的食欲，是食品生產中不可缺少的重要組成部分。人工合成的色素，色澤鮮艷，著色力強，色調多樣，在食品加工過程中穩(wěn)定性好且價格低廉，但作為化學合成物常具有一定毒性，我國《食品添加劑使用衛(wèi)生標準》中規(guī)定了食用合成色素的使用范圍及使用量。其中莧菜紅、胭脂紅、赤蘚紅、誘惑紅、新紅的使用量為0.05g／kg，檸檬黃、日落黃、靛藍的使用量為0.1g／kg，亮藍的使用量為0.025g／kg。

國家標準

GB／T 5009．35—2003食品中合成著色劑的測定——高效液相色譜法。

測定方法

1．試樣處理

(1)橘子汁、果味水、果子露汽水等 稱取20.O～40.0g，放入100mL燒杯中，含二氧化碳的試樣加熱去除二氧化碳。

(2)配制酒類 稱取20.0～40.0g，放入100mL燒杯中，加小碎瓷片數片，加熱去除乙醇。

(3)硬糖、蜜餞類、淀粉軟糖等 稱取5.00～10.00g粉碎試樣，放入100ml。小燒杯中，加水30mL，溫熱溶解，若試樣溶液pH值較高，用檸檬酸溶液調pH值到6左右。

(4)巧克力豆及著色糖衣制品 稱取5.00～10.00g，放入100mL小燒杯中，用水反復洗滌色素，到試樣無色素為止，合并色素漂洗液為試樣溶液。

2．色素提取

(1)聚酰胺吸附法 試樣溶液加檸檬酸溶液調pH值到6，加熱至60℃，將lg聚酰胺粉加少許水調成粥狀，倒入試樣溶液中，攪拌片刻，以G3垂融漏斗抽濾，用60℃ pH值為4的水洗滌3～5次，然后用甲醇一甲酸混合溶液洗滌3～5次(含赤蘚紅的試樣用液一液分配法處理)，再用水洗至中性，用乙醇-氨水-水混合溶液解吸3～5次，每次5mL，收集解吸液，加乙酸中和，蒸發(fā)至近干，加水溶解，定容至5mL。經0.45?m濾膜過濾，取10?L進高效液相色譜儀。

(2)液一液分配法(適用于含赤蘚紅的試樣)將制備好的試樣溶液放入分液漏斗中，加2mL鹽酸、三正辛胺一正丁醇溶液(5％)10-20mL，振搖提取，分取有機相，重復提取至有機相無色，合并有機相，用飽和硫酸鈉溶液洗2次，每次10mL，分取有機相，放蒸發(fā)皿中，水浴加熱濃縮至10mL，轉移至分液漏斗中，加60mL正己烷，混勻，加氨水提取2～3次，每次5mL，合并氨水溶液層(含水溶性酸性色素)，用正己烷洗2次，氨水層加乙酸調成中性，水浴加熱蒸發(fā)至近干，加水定容至5mL。經濾膜0.45?m過濾，取10?l進高效液相色譜儀。

高效液相色譜參考條件

儀器：LC-901液相色譜儀配置紫外檢測器，254nm波長。

色譜柱：YWG-C1810?m不銹鋼柱4.6mm(i.d)×250mm。

流動相：甲醇一乙酸銨溶液(pH值為4，0.02mol／L)。

梯度洗脫：甲醇20％～35％，3%／min；35％～98％，9%／min；98％繼續(xù)6min。

流速：lmL／min。

4．測定

取相同體積樣液和合成著色劑標準使用液分別注入高效液相色譜儀，根據保留時間定性，外標峰面積法定量。

5．結果計算

X=A*1000/m*V2/V1*1000*1000

式中 X——試樣中著色劑的含量，g／kg；

A——樣液中著色劑的質量，?g；

V2——進樣體積，mL；

V1——試樣稀釋后總體積，mL；

m——試樣質量，g。

6．試劑

①正己烷。

②鹽酸。

③乙酸。

④甲醇：經0.5?m濾膜過濾。

⑤聚酰胺粉(尼龍6)：過200目篩。

⑥乙酸銨溶液(0.02mol／L)：稱取1.54g乙酸銨加水至1000mL，溶解，經0.45?m濾膜過濾。

⑦氨水：量取氨水2mL，加水至100mL，混勻。

⑧氨水一乙酸銨溶液(O.02mol／L)，量取氨水0.5mL，加乙酸銨溶液(O.02mol／L)至1000mL，混勻。

⑨甲醇一甲酸(6+4)溶液。

⑩檸檬酸溶液：稱取20g檸檬酸(C6H8O7·H2O)，加水至100mL，溶解混勻。

⑥無水乙醇一氨水一水(7+2+1)溶液：無水乙醇70mL，氨水20mL，水10mL，混勻。

⑥三正辛胺一正丁醇溶液(5％)：量取三正辛胺5mL，加正丁醇至100mL，混勻。

⑥飽和硫酸鈉溶液。

⑩硫酸鈉溶液(2g／L)。

⑥pH值為6的水：水加檸檬酸溶液調pH一6。

⑩合成著色劑標準溶液：準確稱取按其純度折算為100％質量的檸檬黃、日落黃、莧菜紅、胭脂紅、新紅、赤蘚紅、亮藍、靛藍各0.100g，置于100mL容量瓶中，加pH值為6的水至刻度，配成水溶液(1.00mg／mL)。

⑩合成著色劑標準使用液：臨用時上述溶液加水稀釋20倍，經0.45?m濾膜過濾，配成每毫升相當于50.0?g的合成著色劑。

7．儀器

普瑞LC-901型高效液相色譜儀：帶紫外檢測器，254nm波長。

更新時間：2024/11/7 8:32:54